内容概要
DNA 损伤是遗传毒性、辐射暴露、氧化应激等因素诱导的核心细胞事件,与肿瘤发生、神经退行性病变、生殖毒性等病理过程密切相关。单细胞凝胶电泳(又称彗星实验)是目前检测单细胞水平 DNA 单链与双链断裂最灵敏的技术之一,可直观呈现 DNA 损伤程度,被广泛应用于遗传毒理、辐射生物、环境安全评价等领域。传统彗星实验需自行制备琼脂糖凝胶玻片,多层铺胶操作繁琐,样本易脱落,实验重复性差。Abbkine 彗星法 DNA 损伤分析试剂盒(3 孔载玻片,货号 KTA3040)配套特制 3 孔彗星载玻片,省去多层琼脂糖繁琐铺胶步骤,操作简便、样本附着力强、检测灵敏度高,可快速完成细胞 DNA 损伤的定性与定量分析,为 DNA 损伤相关研究提供稳定可靠的实验方案。
产品介绍
Abbkine KTA3040 试剂盒是专为单细胞 DNA 损伤检测优化的彗星实验试剂,全套组分包含 3 孔彗星载玻片、10× 裂解液、500 mM EDTA 溶液、低熔点琼脂糖、50× 碘化丙啶(PI)染色液以及 40 mM Tris-HCl(pH 7.5)缓冲液,覆盖凝胶制备、细胞裂解、电泳、染色全流程所需试剂,无需额外准备核心耗材即可开展完整实验。
该产品规格为 15 次检测,采用蓝冰冷链运输,收到后于 4℃避光环境可稳定保存 6 个月。与传统自制玻片的彗星实验体系相比,该试剂盒配套的 3 孔专用载玻片经过表面处理,凝胶附着力显著提升,样本在裂解、电泳过程中不易脱落;同时预优化的试剂配方无需自行调整浓度,大幅减少实验摸索环节,有效提升实验成功率与结果重复性。
检测原理
该试剂盒基于碱性单细胞凝胶电泳技术实现 DNA 损伤检测。当细胞受到辐射、化学毒物、氧化应激等因素作用时,染色体 DNA 会发生单链或双链断裂,产生大量游离的 DNA 片段。实验过程中,将细胞与低熔点琼脂糖混合后铺于彗星载玻片上,形成凝胶包埋的单细胞层;随后用裂解液破坏细胞膜与核膜,释放出细胞内的 DNA。
在碱性电泳条件下,DNA 双链发生解旋,暴露出断裂的单链末端;施加电场后,结构完整的大分子 DNA 因分子量大、迁移阻力高,停留在原位形成彗星 “头部”;而断裂的小分子量 DNA 碎片会向阳极方向迁移,形成拖尾状的彗星 “尾部”。经 PI 荧光染料染色后,在荧光显微镜下可观察到典型的彗星状图像,DNA 损伤越严重,拖尾越长、尾部荧光强度越高。通过分析尾长、尾矩、尾部 DNA 占比等参数,即可对单细胞水平的 DNA 损伤程度进行精准定量。
产品优势
其一,配套专用玻片,试剂一站式配齐。试剂盒内置经过表面优化的 3 孔彗星载玻片,无需自行处理普通玻片、无需铺制多层不同熔点的琼脂糖凝胶,大幅简化实验前的准备工作;同时包含裂解液、缓冲液组分、染色液等全部核心试剂,开箱即可开展实验,有效降低实验筹备成本与操作误差。
其二,样本附着力强,实验稳定性高。特制载玻片的表面处理工艺提升了琼脂糖凝胶的附着能力,相比传统多层铺胶法,样本在裂解、电泳过程中不易脱落,实验成功率显著提升,批内与批间实验结果的重复性更优异。
其三,操作流程简化,新手友好度高。试剂盒优化了实验步骤与试剂浓度,无需自行调试裂解时间、电泳参数,按照标准流程即可获得稳定的彗星图像,大幅降低了彗星实验的操作门槛,即使是首次开展该实验的研究者也能快速获得合格结果。
其四,检测灵敏度优异。碱性电泳体系可同时检测 DNA 单链断裂与双链断裂,能够捕捉低剂量损伤因素导致的微弱 DNA 损伤,适合低浓度毒物筛查、亚毒性剂量损伤评估等对灵敏度要求较高的研究场景。
应用领域
在遗传毒理学研究中,该试剂盒可用于检测化学药物、纳米材料、食品添加剂、环境污染物的遗传毒性,评估受试物诱导 DNA 损伤的潜力,为安全性评价提供核心实验数据。
在辐射生物学研究领域,可用于检测电离辐射、紫外线照射对细胞的 DNA 损伤效应,评估辐射防护剂的保护效果,研究 DNA 损伤修复的动力学过程,是放射医学与辐射防护研究的常用工具。
在肿瘤药理研究中,可用于评估铂类、烷化剂等 DNA 损伤类化疗药物对肿瘤细胞的 DNA 断裂作用,研究肿瘤细胞的 DNA 损伤修复能力与耐药机制,为化疗药物优化与增敏剂开发提供实验依据。
在环境与职业毒理评价中,可用于检测重金属、工业毒物、大气颗粒物等环境因素对细胞的 DNA 损伤效应,评估环境暴露的遗传风险,为环境健康研究提供技术支撑。
总结
Abbkine 彗星法 DNA 损伤分析试剂盒(3 孔载玻片)KTA3040 以专用载玻片为核心特色,解决了传统彗星实验操作繁琐、样本易脱落、重复性差的痛点,兼具操作简便、灵敏度高、结果稳定的优势,能够为 DNA 损伤相关的各类科研工作提供可靠的单细胞水平检测方案,助力遗传毒理、辐射生物、肿瘤药理等领域的研究深入开展。


