内容概要
乳酸脱氢酶(LDH)是广泛存在于所有有核细胞胞浆中的稳定氧化还原酶,催化乳酸与丙酮酸的相互转化,是糖酵解通路的关键酶之一。当细胞膜受到损伤发生破裂时,LDH 会快速释放到胞外或体液中,因此胞外或组织中的 LDH 活性是评估细胞损伤、组织坏死程度的经典生化指标,广泛应用于细胞毒性检测、组织损伤评价、疾病诊断研究等领域。Abbkine CheKine™ 乳酸脱氢酶(LDH)活性检测试剂盒(微量法,货号 KTB1110)采用 WST-8 显色体系,检测灵敏度显著优于传统方法,线性范围宽,配套 LDH 标准品支持绝对定量。试剂盒适配动植物组织、细胞、细菌、血清、尿液等多种样本类型,支持 96 孔板高通量检测,操作快速简便,是 LDH 活性检测的高性价比之选。
产品介绍
Abbkine KTB1110 试剂盒是基于 WST-8 比色法的 LDH 活性定量检测试剂,全套组分包括检测缓冲液、乳酸底物、NAD⁺溶液、WST-8 显色液、增强剂以及 LDH 标准品,规格为 96 次检测,采用蓝冰冷链运输,-20℃避光储存有效期可达 6 个月。
该试剂盒样本覆盖范围极广,可检测动植物组织匀浆、培养细胞裂解液、细菌样本、血清、血浆、尿液以及其他生物体液中的 LDH 活性。配套的 LDH 标准品可用于绘制标准曲线,实现 LDH 活性的绝对定量,无需依赖相对活性计算。试剂盒优化的显色体系产物水溶性好、无沉淀,适配 96 孔板高通量检测模式,适合大批量样本的批量处理,能够显著提升实验效率。
检测原理
该试剂盒基于酶促偶联比色反应定量检测 LDH 活性。第一步,乳酸脱氢酶催化底物乳酸发生氧化反应,生成丙酮酸,同时将辅酶 NAD⁺还原为 NADH,这一步反应的速率与样本中 LDH 的活性正相关。
第二步,在电子载体与增强剂的协同作用下,生成的 NADH 将水溶性四唑盐 WST-8 还原,生成橙黄色的水溶性甲臜产物。该产物在 450nm 波长处具有特征吸收峰,其吸光度值与体系中 NADH 的生成量呈正相关,进而与样本中的 LDH 活性呈严格正比关系。通过同步检测已知活性的 LDH 标准品梯度,绘制标准曲线并拟合线性方程,即可代入样本吸光度值计算出样本中 LDH 的绝对活性。与传统 INT、MTT 显色体系相比,WST-8 生成的产物水溶性更强、本底更低、灵敏度更高,检测结果更准确稳定。
产品优势
其一,WST-8 显色灵敏度优异。采用升级的 WST-8 显色体系,相比传统四唑盐底物显色效率更高、本底更低,能够检测更低水平的 LDH 活性,对于低丰度样本也能获得稳定的检测信号,检测灵敏度与线性范围均优于传统方法。
其二,样本类型覆盖全面。覆盖动植物组织、培养细胞、细菌、血清、血浆、尿液以及其他生物体液,既可以检测细胞内总 LDH 活性,也可以检测细胞培养上清、体液中的释放型 LDH,一套试剂满足多元检测需求。
其三,配套标准品支持绝对定量。试剂盒提供经过校准的 LDH 标准品,可绘制标准曲线实现酶活性的绝对定量,相比相对活性计算结果更准确,不同批次、不同实验室之间的数据可比性更强,更适合学术发表。
其四,高通量适配操作简便。采用 96 孔板微量反应体系,操作流程标准化,适合大批量样本的高通量检测;实验步骤简单,无需复杂前处理,加样孵育后即可读数,能够快速完成批量样本检测,大幅提升实验效率。
应用领域
在细胞毒性与药物筛选研究中,通过检测药物处理后细胞培养上清中的 LDH 释放量,可评估候选化合物的细胞毒性与膜损伤程度,计算半数毒性浓度,是药物安全性评价与化合物初筛的常规检测指标。
在组织损伤与疾病研究中,血清、组织中的 LDH 活性是反映组织坏死程度的敏感生化指标,广泛应用于心肌损伤、肝损伤、肾损伤等疾病模型的研究中,用于评估疾病严重程度与治疗药物的保护效果。
在微生物发酵研究中,LDH 活性是微生物糖代谢能力的重要指标,可用于监测发酵过程中微生物的代谢状态,优化发酵工艺条件,提升目标产物的发酵产量。
在食品与环境毒理评价中,可用于检测食品污染物、环境毒物、纳米材料等受试物的细胞毒性与组织损伤效应,评估其健康风险,为食品安全与环境健康评价提供实验依据。
总结
Abbkine CheKine™ 乳酸脱氢酶(LDH)活性检测试剂盒 KTB1110 以高灵敏度的 WST-8 显色体系为核心,兼具检测灵敏、样本广谱、定量准确、高通量适配的多重优势,能够为各类 LDH 相关研究提供稳定可靠的活性定量数据。无论是细胞毒性筛选、组织损伤评价还是代谢研究,该试剂盒都是高效、精准的检测工具,助力科研工作高效推进。

