血清替代应用丨人血小板裂解液hPL对T细胞扩增与TCM表型的影响：Sexton nLiven PR培养体系解析

摘要：
在人免疫细胞治疗快速发展的背景下，培养基补充剂对于T细胞扩增效率、细胞表型稳定性以及治疗效果具有重要影响。本文基于Sexton公开研究资料，系统解析人血小板裂解液（hPL）nLiven PR在T细胞培养中的应用表现，包括PBMCs扩增、中央记忆T细胞（TCM）维持、供体一致性以及与AB血清（ABS）之间的差异，为CAR-T、TCR-T及免疫细胞治疗培养体系优化提供参考。

关键词：
人血小板裂解液；hPL；T细胞培养；TCM；中央记忆T细胞；CAR-T；TCR-T；nLiven PR；免疫细胞治疗；细胞培养补充剂；AB血清；PBMC；细胞治疗；PR工艺；细胞扩增

一、前言：为什么T细胞培养越来越关注TCM表型

近年来，以CAR-T、TCR-T为代表的T细胞疗法，已成为肿瘤尤其是血液肿瘤治疗的重要方向。

传统细胞治疗通常更加关注：

• 最终细胞总数
• 细胞扩增倍数
• 杀伤效率

等指标。

但越来越多研究发现：

T细胞最终的“表型质量”对于体内持久性与疗效同样关键。

其中：

TCM（Central Memory T Cell）

即：

中央记忆型T细胞

被认为是目前免疫细胞治疗中非常重要的功能性细胞亚群。

相比终末效应T细胞：

TCM细胞具有：

• 更强扩增能力
• 更长体内持续时间
• 更强归巢能力
• 更好的抗肿瘤持久性

等特点。

研究表明：

中央记忆T细胞在多种疾病模型中，相较效应记忆T细胞具有更优抗肿瘤效果。

TCM细胞的来源与特点

TCM来源于：

初始T细胞（Naive T Cell）

在抗原刺激后形成。

其能够：

• 长期存活
• 返回淋巴组织
• 再次受到抗原刺激后迅速扩增

因此在CAR-T与TCR-T治疗中：

TCM比例通常被视为：

治疗质量的重要指标。

图1 中央记忆T细胞TCM的分化由来

二、传统培养补充剂面临的问题

目前免疫细胞治疗生产中：

培养基补充剂主要包括：

• 胎牛血清（FBS）
• 人AB血清（ABS）

等。

但这些体系存在明显问题。

1、FBS存在动物源风险

胎牛血清虽然长期用于细胞培养，但存在：

• 动物源风险
• 批次差异
• 监管压力
• 病原污染风险

等问题。

因此在细胞治疗领域：

越来越倾向于：

减少甚至避免动物源成分。

2、人AB血清存在供体差异问题

相比FBS：

ABS虽属于人源体系，但依然存在：

• 供体来源受限
• 批次稳定性不足
• 成分波动
• 表型影响不确定

等问题。

尤其对于：

• CAR-T
• TCR-T
• NK细胞

等产品而言：

培养体系稳定性直接影响最终细胞质量。

三、人血小板裂解液（hPL）为什么受到关注

什么是hPL

Human Platelet Lysate（hPL）

即：

人血小板裂解液

是将人血小板裂解后获得的培养基补充剂。

其富含：

• 生长因子
• 细胞因子
• 趋化因子
• 细胞调控蛋白

等活性成分。

图2 血小板裂解液hPL组成成分

hPL在细胞治疗中的优势

相比传统血清体系：

hPL通常具有：

• 更接近人源环境
• 更高安全性
• 更低动物源风险
• 更适合临床转化

等特点。

同时：

不同品牌hPL在：

• 工艺
• 病原体控制
• 一致性
• 表型维持

等方面也存在差异。

四、Sexton nLiven PR与ABS对T细胞扩增的比较

为了评估：

hPL对于T细胞治疗生产体系的影响

HCATS与Sexton开展了相关研究。

主要比较：

• nLiven PR
• 人AB血清（ABS）

两种培养体系。

五、PBMC扩增实验结果分析

研究人员从：

两名供体PBMCs

开始实验。

使用：

• CD3/CD28激活
• 静态培养体系
• 培养14天

进行比较。

实验结果

在培养第8天：

PBMC总数差异尚不明显。

但到了第10天：

nLiven PR组扩增明显高于ABS组。

同时：

FACS分析显示：

nLiven PR组：

• CD3+比例更高
• T细胞亚群占比更高

说明：

hPL体系更有利于T细胞亚群扩增。

图3 两名供体PBMCs在ABS与hPL体系中的扩增比较

六、hPL对TCM表型的影响

相比单纯关注：

• 细胞总数
• 扩增倍数

研究者越来越重视：

TCM细胞比例。

为什么TCM比例重要

TCM比例越高：

通常意味着：

• 更强持久性
• 更好体内扩增
• 更长治疗窗口
• 更优治疗效果

因此：

最终产品中TCM比例已经成为：

细胞治疗质量评价的重要方向。

nLiven PR对TCM的影响

实验结果显示：

在静态培养体系中：

虽然：

• ABS组
• nLiven PR组

总细胞产量接近。

但：

nLiven PR组TCM比例显著增加。

而ABS组随着扩增：

TCM比例明显下降。

图4 nLiven PR在培养14天后持续提升PBMCs中TCM比例

CD3+细胞实验结果

研究进一步采用：

CD3+阳性细胞

作为起始细胞。

结果发现：

在培养结束时：

约50%的T细胞亚群为TCM。

并且：

nLiven组TCM比例显著高于ABS组。

图5 三个供体CD3+细胞培养后TCM比例比较

七、为什么nLiven PR更有利于维持TCM

研究指出：

在传统ABS培养体系中：

T细胞扩增往往伴随着：

向效应表型分化。

而nLiven PR则表现出：

• 更稳定TCM维持
• 更低终末分化倾向

说明：

其可能更加适合：

• CAR-T
• TCR-T
• 长期免疫治疗

等应用。

研究中明确提出：

nLiven PR在整个体外培养过程中，对TCM表型具有选择性维持作用。

八、hPL对供体一致性的影响

细胞治疗另一个重要问题是：

供体差异。

不同供体来源：

通常会导致：

• 扩增效率波动
• 表型差异
• 产品一致性下降

等问题。

搅拌培养体系实验

研究人员进一步在：

搅拌式生物反应器

中进行验证。

采用：

• Dynabeads CD3/CD28激活
• 培养11天

比较：

• ABS
• nLiven PR

两种体系。

实验结果

结果显示：

两组：

总扩增倍数差异不明显。

但：

nLiven PR组供体间变异明显更低。

具体来看：

• nLiven PR组CV值约10%
• ABS组CV值约23%

说明：

hPL体系能够降低供体差异带来的波动。

图6 nLiven PR组供体间变异更低

九、TCM维持与治疗长期效果之间的关系

目前越来越多研究认为：

T细胞治疗的关键不仅是：

• 杀伤能力
• 扩增数量

更重要的是：

长期持续性。

而TCM恰好与：

• 体内长期扩增
• 免疫持续性
• 复发控制

等密切相关。

因此：

培养过程中：

如何维持：

• TCM比例
• 低分化状态
• 干性特征

已成为细胞治疗工艺开发的重要方向。

十、nLiven PR在T细胞培养中的潜在意义

综合实验结果：

nLiven PR在人免疫细胞培养中表现出：

1、更稳定的T细胞扩增

相比ABS：

扩增效率更稳定。

2、更高TCM比例

有利于：

• 长期疗效
• 体内持续性

等。

3、更低供体差异

有利于：

• GMP生产
• 标准化工艺
• 临床一致性

等。

4、更适合细胞治疗转化

包括：

• CAR-T
• TCR-T
• NK细胞
• 免疫细胞治疗

等方向。

十一、其他研究结果支持

美国贝勒医学院相关研究也显示：

相比：

• FBS
• ABS

使用：

nLiven培养的T细胞

表现出：

• 更高存活率
• 更高TCM比例
• 更低分化水平

等特点。

图7 相比FBS与ABS，nLiven更有利于维持较低分化状态

十二、Sexton hPL产品体系简介

目前Sexton提供多种：

无动物源hPL产品

包括：

• Stemulate
• nLiven PR
• T-Liven

等。

其中：

nLiven PR

采用：

PR（Pathogen Reduced）病原体减少工艺

适用于：

• 免疫细胞治疗
• GMP生产
• 临床研究

等。

T-Liven

属于：

封闭袋装系统hPL

并经过：

• T细胞生长验证
• 临床工艺优化

适用于：

• CAR-T
• TCR-T
• GMP工艺

等方向。

图8 T-Liven封闭袋装系统

十三、总结

在人免疫细胞治疗持续发展的背景下：

培养体系已经不仅仅关注：

• 细胞数量
• 扩增倍数

而是更加关注：

• TCM比例
• 细胞质量
• 长期治疗效果
• GMP一致性

等指标。

基于目前公开研究结果：

Sexton nLiven PR在人T细胞培养中表现出：

• 更稳定扩增
• 更高TCM比例
• 更低供体差异
• 更适合临床转化

等特点。

对于：

• CAR-T
• TCR-T
• 免疫细胞治疗
• GMP细胞工艺开发

等方向具有较高参考价值。

参考文献

本文基于Sexton公开资料由其中国官方提供商上海曼博生物整理，仅用于科研信息分享。上海曼博生物可提供Sexton人血小板裂解液、nLiven PR、T-Liven血小板裂解液及细胞治疗培养基补充剂相关产品与技术支持，支持T细胞培养、免疫细胞治疗及细胞治疗工艺开发应用。